Uso e cuidados com meios de cultura em placa: boas práticas para resultados microbiológicos confiáveis

Os meios de cultura são ferramentas essenciais para a microbiologia, fornecendo condições adequadas para o crescimento, isolamento, diferenciação e, conforme sua finalidade, quantificação de microrganismos.

Os meios de cultura prontos em placa oferecem praticidade e padronização à rotina laboratorial, eliminando diversas etapas relacionadas ao preparo interno. Entretanto, mesmo um produto fabricado e liberado após controles de qualidade pode ter suas características comprometidas quando submetido a condições inadequadas de armazenamento, manipulação ou utilização.

Temperaturas inadequadas, variações térmicas frequentes, ressecamento, contaminação ou alterações físicas do meio podem interferir no crescimento microbiano e, consequentemente, na qualidade da análise.

Por isso, alguns cuidados são fundamentais desde o recebimento das placas até sua utilização.

1. Armazenamento: siga sempre a temperatura indicada na Instrução de Uso

O armazenamento adequado é fundamental para preservar as características do meio de cultura durante sua vida útil.

As placas devem ser conservadas nas condições de temperatura especificadas no rótulo e na Instrução de Uso de cada produto Newprov, respeitando também o prazo de validade.

Além da temperatura, devem ser evitadas variações térmicas desnecessárias. Retirar repetidamente o produto da refrigeração, permitir seu aquecimento e refrigerá-lo novamente pode favorecer alterações na distribuição da água presente no meio e contribuir para seu ressecamento.

Uma boa prática é retirar do armazenamento somente a quantidade de placas necessária para a rotina.

2. Condensação: presença de água significa que a placa está inadequada?

Não necessariamente.

Essa é uma dúvida frequente na rotina dos laboratórios.

Os meios de cultura sólidos possuem elevada quantidade de água em sua composição. Quando ocorrem variações de temperatura, pode haver formação de condensação no interior da placa.

A presença de condensação, portanto, deve ser avaliada juntamente com as demais características do produto e não deve ser utilizada, isoladamente, como critério para considerar uma placa inadequada.

Quando houver água acumulada, devem ser seguidas as orientações estabelecidas na Instrução de Uso do produto antes da inoculação.

É importante observar principalmente a presença de outras alterações, como:

• ressecamento do meio;
• contaminação visível;
• alteração significativa do aspecto ou da coloração;
• embalagem danificada ou violada;
• alterações físicas que possam comprometer a utilização da placa.

Na presença dessas condições, o produto não deve ser utilizado sem a devida avaliação e orientação do fabricante.

3. Por que evitar refrigeradores frost-free?

Para os meios de cultura em placa cuja Instrução de Uso apresente essa recomendação, o armazenamento em refrigeradores frost-free deve ser evitado.

Esse tipo de equipamento utiliza circulação de ar para reduzir a formação de gelo, podendo exercer efeito desidratante sobre os produtos armazenados.

Nos meios de cultura sólidos, a perda progressiva de água pode provocar ressecamento do ágar, alterando as características físicas da superfície e potencialmente comprometendo sua utilização.

Além da escolha adequada do equipamento, o laboratório deve controlar as condições de armazenamento e assegurar que a temperatura permaneça dentro dos limites especificados para cada produto.

4. A posição das placas durante o armazenamento também é importante

Quando previsto na Instrução de Uso do produto Newprov, recomenda-se armazenar as placas com o meio de cultura voltado para cima.

Esse posicionamento contribui para reduzir o contato da água de condensação com a superfície do ágar.

Também é importante manter as embalagens íntegras e evitar condições de armazenamento que possam provocar deformações ou danos físicos às placas.

5. Antes da utilização, deixe a placa estabilizar

Quando indicado na Instrução de Uso, as placas refrigeradas devem ser retiradas com antecedência suficiente para que o meio se estabilize à temperatura ambiente antes da utilização.

Esse cuidado é especialmente importante quando existe condensação.

Uma superfície com quantidade excessiva de água pode interferir na distribuição do inóculo e dificultar a obtenção de colônias adequadamente isoladas.

Entretanto, não existe um procedimento único de estabilização ou secagem aplicável a todos os meios de cultura. As orientações específicas da Instrução de Uso de cada produto devem ser seguidas.

Também deve ser evitada a repetição desnecessária de ciclos de retirada da refrigeração, estabilização e nova refrigeração.

6. Faça uma inspeção antes de utilizar a placa

Antes da inoculação, uma inspeção simples pode ajudar a identificar alterações capazes de comprometer a análise.

Verifique:

• prazo de validade;
• integridade da embalagem;
• integridade física da placa;
• aspecto e coloração característicos do meio;
• presença de sinais de contaminação;
• presença de ressecamento;
• alterações na superfície do ágar;
• presença de água em quantidade que possa interferir na inoculação.

Nunca utilize produtos com prazo de validade expirado, embalagem original danificada, sinais de contaminação ou ressecamento.

Na dúvida sobre o aspecto ou as condições de uma placa, consulte a Instrução de Uso ou entre em contato com o SAC Newprov antes da utilização.

7. Meios cromogênicos: cuidados adicionais com os substratos

Os meios cromogênicos da linha Cromonew utilizam substratos que possibilitam a diferenciação de determinados microrganismos por meio do desenvolvimento de características de coloração.

Por essa razão, alguns produtos dessa linha podem exigir cuidados adicionais relacionados à exposição à luz e à temperatura.

Quando indicado na Instrução de Uso, deve-se evitar exposição excessiva à luz e aquecimento inadequado, condições que podem interferir na estabilidade dos substratos cromogênicos.

A coloração observada deve ser interpretada de acordo com as características de desempenho e os critérios estabelecidos na Instrução de Uso específica de cada produto.

É importante lembrar também que, quando a finalidade do produto estabelecer uma identificação presuntiva, a característica observada no meio não deve ser interpretada automaticamente como identificação definitiva do microrganismo. Testes complementares devem ser realizados sempre que previstos pelo método ou pela respectiva Instrução de Uso.

8. Técnica microbiológica e biossegurança são indispensáveis

A qualidade do meio não elimina a necessidade de boas práticas microbiológicas durante sua utilização.

A manipulação deve ser realizada de forma a reduzir os riscos de contaminação da amostra, do meio, do profissional e do ambiente.

Entre os principais cuidados estão:

• utilizar os equipamentos de proteção individual aplicáveis à atividade;
• realizar a higiene adequada das mãos;
• utilizar materiais apropriados e, quando aplicável, estéreis;
• manter a área de trabalho limpa e organizada;
• evitar manter a placa aberta além do tempo necessário;
• seguir os procedimentos de biossegurança definidos pelo laboratório;
• utilizar equipamentos de contenção quando indicados pela avaliação de risco e pelo procedimento realizado.

A Organização Mundial da Saúde adota uma abordagem de biossegurança laboratorial baseada em avaliação de risco, de modo que as medidas de proteção e contenção devem ser compatíveis com os agentes, amostras e procedimentos realizados.

9. Inoculação e incubação: cada meio possui condições específicas

Não existe uma única condição de inoculação e incubação aplicável a todos os meios de cultura.

Temperatura, tempo, atmosfera e técnica de inoculação dependem da finalidade do meio, do microrganismo pesquisado, do tipo de amostra e do método utilizado.

Por isso, após a inoculação, devem ser seguidas as condições estabelecidas na Instrução de Uso do produto e no procedimento adotado pelo laboratório.

Condições inadequadas de incubação podem modificar o crescimento microbiano e as características esperadas das colônias, dificultando ou comprometendo a interpretação dos resultados.

10. Rastreabilidade também faz parte da qualidade

A rastreabilidade dos materiais utilizados é importante para o sistema da qualidade e para permitir a investigação de eventuais desvios.

Conforme os procedimentos internos aplicáveis, devem ser mantidas as informações necessárias para identificar o meio utilizado, incluindo, quando aplicável:

• produto, fabricante, lote e prazo de validade.

Os meios de cultura em placa da Newprov são submetidos aos controles de qualidade definidos para cada produto e lote antes de sua liberação.

A manutenção das condições adequadas de transporte, armazenamento e utilização pelo laboratório contribui para preservar as características do produto durante sua vida útil.

11. Após o uso: atenção ao descarte

Após o contato com a amostra, as placas devem ser manipuladas e descartadas considerando o risco biológico associado ao material processado.

O descarte deve seguir o Plano ou Programa de Gerenciamento de Resíduos adotado pelo laboratório, os procedimentos internos de biossegurança e a legislação aplicável.

A descontaminação e o gerenciamento adequado de resíduos fazem parte das medidas recomendadas para a manutenção da biossegurança no ambiente laboratorial.

Boas práticas ajudam a preservar o desempenho do meio

A confiabilidade de uma análise microbiológica depende de diferentes fatores: qualidade da amostra, escolha do meio de cultura adequado, condições corretas de armazenamento, técnica de inoculação, condições de incubação, biossegurança e interpretação apropriada dos resultados.

Os meios de cultura em placa da Newprov são produzidos e liberados após os controles de qualidade estabelecidos para cada produto. Após o recebimento pelo laboratório, o cumprimento das condições indicadas no rótulo e na Instrução de Uso é fundamental para preservar suas características durante a vida útil.

Antes de utilizar qualquer meio de cultura, consulte sempre a Instrução de Uso vigente do produto.

Em caso de dúvidas sobre armazenamento, condensação, aspecto do meio, condições de utilização ou outras orientações técnicas, entre em contato com o SAC Newprov. [email protected]

Newprov – Por respeito à vida.

Referências

1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). M22-A3 – Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media; Approved Standard – Third Edition. Wayne, PA: CLSI; 2004. Documento arquivado pelo CLSI e mantido como referência técnica.
2. World Health Organization (WHO). Laboratory Biosafety Manual. 4th ed. Geneva: WHO; 2020.
3. World Health Organization (WHO). Laboratory Biosafety Manual, 4th edition: Decontamination and Waste Management. Geneva: WHO; 2020.
4. Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde – Módulo 4: Procedimentos Laboratoriais: da requisição do exame à análise microbiológica e laudo final. Brasília: Anvisa.
5. ISO. ISO 11133:2014 – Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media. Aplicável como referência complementar às atividades abrangidas por seu escopo.
6. NEWPROV Produtos para Laboratório Ltda. Instruções de Uso vigentes dos respectivos meios de cultura em placa.

As condições de armazenamento, preparação para uso, inoculação, incubação e interpretação podem variar entre os diferentes meios de cultura. Consulte sempre o rótulo e a Instrução de Uso vigente do produto.